En la criopreservación lenta de células adheridas en monocapa, la caída de células del sustrato es uno de los principales factores que afectan el efecto de la criopreservación. La causa principal de esta caída es la diferencia en los coeficientes de expansión térmica entre el sustrato y las células, mientras que la velocidad de enfriamiento y la temperatura final son factores que afectan el cambio en el coeficiente de expansión térmica. En este estudio, mediante la medición de los coeficientes de expansión térmica de hepatocitos y microportadores durante el proceso de congelación lenta (con velocidades de enfriamiento de 1, 2 y 5 ℃/min, y temperatura final de -30 ℃), se comparó y seleccionó el protocolo de criopreservación con la mínima diferencia de expansión térmica, investigando el efecto del daño por expansión térmica en la eficacia de la criopreservación del complejo de hepatocitos. Los resultados experimentales muestran que a una velocidad de enfriamiento de 1 ℃/min, la diferencia de expansión térmica entre los hepatocitos y los microportadores es mínima, y el efecto de criopreservación del complejo es óptimo, con tasas de supervivencia y adhesión del 62.66%±0.67% y 37.2%±1.25%, respectivamente. El daño por expansión térmica entre las células y los microportadores está presente durante todo el proceso de enfriamiento y es uno de los principales factores que afecta la eficacia de la criopreservación del complejo de hepatocitos.

conservación a baja temperatura; daño por expansión térmica; complejo hepatocitos-microportadores; microscopía a baja temperatura