El sistema de vitrificación por microaspersión produce gotas de tamaño pequeño, logrando la vitrificación con bajas concentraciones de crioprotector a bajas temperaturas. En este estudio se utilizó este sistema para vitrificar células HepG2, investigando el daño celular durante los procesos de carga del crioprotector, aspersión, recepción y vitrificación/reci-calentamiento. Se optimizó la fórmula del crioprotector reduciendo la concentración de Me2SO y añadiendo una cantidad adecuada de trehalosa. Los resultados muestran que todos los procesos de vitrificación por microaspersión causan daño celular, siendo mayores los daños durante la carga del crioprotector, la aspersión, vitrificación y recalentamiento, mientras que la recepción causa menor daño. Además, al reducir la concentración de Me2SO en el crioprotector, la viabilidad celular disminuye notablemente tras la preservación a baja temperatura; a la misma concentración, la vitrificación es más efectiva que la congelación lenta; una cantidad adecuada de trehalosa mejora la protección a baja temperatura, mientras que un exceso tiene un efecto negativo; con 5% Me2SO + 0.3 mol/L trehalosa como crioprotector la tasa de supervivencia celular es (92.42±0.95)% y la adhesión tras 24 h de (95.64±1.03)%, siendo la vitrificación por microaspersión la más eficaz.

Microaspersión;Vitrificación;Daño del proceso;Optimización del crioprotector