Система стеклования с микрокапельным распылением создает мельчайшие капли, позволяя достичь стеклования при низкой концентрации криопротектора и низкой температуре. В данной работе система микрокапельного распыления применялась для стеклования клеток HepG2, изучалось повреждение клеток в процессе загрузки криопротектора, распыления, приема, а также стеклования/размораживания. Формула криопротектора была оптимизирована путем снижения концентрации Me2SO и добавления подходящего количества трегалозы. Результаты показали, что все этапы микрокапельного стеклования наносят повреждения клеткам; наиболее значительные повреждения происходят при загрузке криопротектора, распылении, стекловании и размораживании, тогда как процесс приема вызывает меньший урон. Кроме того, при снижении концентрации Me2SO активность клеток заметно уменьшалась после криоконсервации; при одинаковой концентрации криопротектора эффективность стеклования превосходила эффект медленного замораживания; подходящее количество трегалозы усиливало сохранность при низкотемпературном хранении, тогда как избыток имел обратный эффект. При использовании 5% Me2SO + 0,3 моль/л трегалозы в качестве криопротектора для стеклования клеток выживаемость достигала (92,42±0,95)%, а адгезия через 24 часа составляла (95,64±1,03)%; микрокапельное стеклование показало наилучший результат.

Микрокапельное распыление;Стеклование;Повреждения процесса;Оптимизация криопротектора