Исследование криопротектора на основе шелкового белка для сохранения фибробластов ушей свиней Мэйшань при низких температурах

Teng Yun ,  

Zhou Xinli ,  

Zhang Xiaomin ,  

摘要

Хранение клеток при низких температурах обеспечивает высококачественные клетки для клинического лечения и научных исследований. Объемная доля 10% диметилсульфоксида (ДМСО) и объемная доля 20% эмбриональной бычьей сыворотки (ФБС) являются обычно используемыми криопротекторами для замораживания клеток. Однако ДМСО имеет токсическое воздействие на клетки, а ФБС несет риск передачи вирусов и инфекционных заболеваний. В данной работе в качестве модельных клеток использовались фибробласты ушей свиней Мэйшань для проведения экспериментов по замораживанию, в ходе которых шелковый белок применялся в качестве криопротектора. Различные массовые концентрации серицина и объёмные доли фиброина использовались для замены ФБС и ДМСО соответственно с целью оценки их эффективности при хранении клеток при низких температурах. После оттаивания и восстановления жизнеспособность и рост клеток определяли с помощью метода трипанового синего, МТТ-анализа и приживаемости на пластине в течение 24 часов, что позволило отобрать оптимальную формулу криопротектора на основе натурального шелкового белка. Результаты показали, что криопротектор, содержащий 1% серицина по массе и 20% ФБС по объему, не имел значимых различий в эффективности замораживания клеток уха свиньи, что свидетельствует о способности серицина эффективно заменить ФБС. При снижении концентрации ДМСО с 10% до 5% и добавлении 10% фиброина жизнеспособность и приживаемость клеток не отличались от контрольной группы, что указывает на возможность снижения концентрации ДМСО при использовании фиброина. Совместное применение 1% серицина по массе и 10% фиброина по объему обеспечило высокую эффективность замораживания.

关键词

криопротектор;шелковый белок;безсывороточный криопротектор;фибробласты уха свиньи

阅读全文

以上内容由讯飞翻译自动生成,翻译内容仅供参考。对于因使用本网站翻译内容产生的相关后果,本网站不承担任何商业和法律责任。

The above content is generated by Large Model Translation. The translated content is for reference only. We do not assume any commercial or legal responsibilty for any consequences arising from the use of our website