В процессе криоконсервации ооцитов добавление и удаление криопротекторов являются необходимыми этапами, однако этот процесс может вызывать смертельные осмотические и токсические повреждения клеток. Для изучения степени повреждений комбинированного процесса добавления и удаления криопротектора у клеток свиных MII стадии, в данной работе был разработан и изготовлен микрофлюидный прибор, подходящий для непрерывного добавления и удаления криопротектора в ооцитах. Были использованы микрофлюидный линейный метод и традиционный поэтапный метод для загрузки и удаления криопротектора, проанализированы их влияние на изменение объёма ооцитов, выживаемость и потенциал развития. Результаты показали, что изменение объёма клеток при использовании микрофлюидного линейного метода значительно меньше, чем при поэтапном; после обработки линейным методом выживаемость, скорость деления и образование бластоцист составляли 95,3%, 64,4% и 19,4% соответственно, что значительно выше, чем при традиционном поэтапном методе (79,4%, 43,6%, 9,7%) (P<0.05). Таким образом, использование микрофлюидного устройства для добавления и удаления криопротектора эффективно снижает осмотические повреждения клеток и представляет новый подход для техники криоконсервации ооцитов.

криоконсервация;криопротектор;осмотические повреждения;ооциты