Исследование применения ультразвукового инициирования кристаллизации льда для криоконсервации периферических мононуклеарных клеток крови

Xu Qiang ,  

Li Weijie ,  

Peng Zhengxin ,  

Ding Wei ,  

Lin Chunyan ,  

Shen Jing ,  

Zhou Xinli ,  

摘要

Периферические мононуклеарные клетки крови (PBMC) являются важным ресурсом иммунных клеток, однако традиционные методы медленного замораживания замедляют пролиферацию PBMC и вызывают повреждение подтипов Т-клеток, поэтому необходимо разработать новые технологии криоконсервации для эффективной защиты активности и функций PBMC. Оптимизация процесса замораживания PBMC осуществлялась с использованием ультразвукового инициирования кристаллизации льда, при этом с помощью проточной цитометрии проводился анализ подтипов Т-клеток в замороженных PBMC. Были созданы ультразвуковые установки для инициирования кристаллизации льда, сочетающие ультразвуковой генератор и программируемый терморегулятор, что позволило реализовать бесконтактный метод инициирования кристаллизации. Результаты показали, что процесс замораживания с ультразвуковым инициированием кристаллизации льда превосходит традиционное медленное замораживание по эффективности сохранения PBMC: жизнеспособность PBMC после заморозки составила 94,97%, накопительный коэффициент пролиферации — 204,47, а доля наивных Т-клеток (Tn) после оттаивания достигла 18,35%. Оптимизация процесса криоконсервации PBMC с использованием ультразвукового инициирования кристаллизации льда повысила жизнеспособность, пролиферативный потенциал и долю подтипов Т-клеток, что представляет новый подход к усовершенствованию криоконсервации PBMC.

关键词

периферические мононуклеарные клетки крови;ультразвуковое инициирование кристаллизации льда;криоконсервация;Т-клетки;проточная цитометрия

阅读全文