Estudo sobre preservação em baixas temperaturas de fibroblastos da orelha do porco Meishan usando crioprotetor baseado em proteína de seda

Teng Yun ,  

Zhou Xinli ,  

Zhang Xiaomin ,  

摘要

A preservação celular em baixas temperaturas fornece células de alta qualidade para tratamentos clínicos e pesquisas científicas. A fração volumétrica de 10% de dimetilsulfóxido (DMSO) e a fração volumétrica de 20% de soro fetal bovino (FBS) são atualmente os crioprotetores comumente usados para congelamento celular. No entanto, o DMSO é tóxico para as células, e o FBS apresenta risco de transmitir vírus e doenças infecciosas. Este estudo utilizou fibroblastos da orelha de porco Meishan como células modelo para experimentos de congelamento, empregando proteína de seda como crioprotetor. Diferentes concentrações em massa de sericina e diferentes frações volumétricas de fibroína foram usadas para substituir respectivamente o FBS e o DMSO, a fim de verificar sua eficácia na preservação celular em baixas temperaturas. Após o descongelamento e ressuscitação, a viabilidade e o vigor celular foram avaliados por coloração com azul de tripano, método MTT e taxa de adesão após 24 h, selecionando a melhor formulação de crioprotetor baseada na proteína natural da seda. Os resultados mostraram que o crioprotetor contendo 1% de sericina em massa e 20% de FBS em volume não apresentou diferença significativa no efeito de congelamento das células da orelha do porco, indicando que a sericina pode substituir efetivamente o FBS. Ao reduzir a concentração de DMSO de 10% para 5% e adicionar 10% de fibroína em volume, a taxa de sobrevivência e a taxa de aderência celular não apresentaram diferenças significativas em relação ao grupo controle, demonstrando que a fibroína pode reduzir a concentração de DMSO. A combinação de 1% de sericina em massa e 10% de fibroína em volume alcançou um bom efeito de congelamento.

关键词

crioprotetor;proteína de seda;crioprotetor sem soro;fibroblastos da orelha do porco

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