누에고치 단백질 기반 저온 보호제를 이용한 메이산 돼지 귀 섬유아세포 저온 저장 연구

Teng Yun ,  

Zhou Xinli ,  

Zhang Xiaomin ,  

摘要

세포 저온 저장은 임상 치료와 과학 연구를 위한 고품질 세포를 제공합니다. 체적 분율 10% 디메틸설폭사이드(DMSO)와 체적 분율 20% 태아우혈청(FBS)은 현재 세포 동결에 널리 사용되는 보호제입니다. 그러나 DMSO는 세포에 독성 손상을 일으키며, FBS는 바이러스 운반 및 질병 감염 위험이 존재합니다. 본 논문은 메이산 돼지 귀 섬유아세포를 모델 세포로 하여 동결 실험을 진행하였으며, 저온 보호제로 누에고치 단백질을 사용하였습니다. 서로 다른 질량 농도의 세리신과 서로 다른 체적 분율의 피브로인으로 각각 FBS와 DMSO를 대체하여 세포 저온 보존에서의 유효성을 검증하였습니다. 해동 후 생존율과 성장 활력은 트리판 청염색법, MTT법, 24시간 부착률 등을 통해 측정하여 천연 누에고치 단백질 기반 저온 보호제 조합의 최적 조성을 선별하였습니다. 결과는 질량 농도 1% 세리신과 체적 분율 20% FBS가 포함된 저온 보호제가 돼지 귀 세포 동결 효과에 유의한 차이가 없음을 보여주어 세리신이 FBS를 효과적으로 대체할 수 있음을 나타냅니다. 체적 분율 10% DMSO 농도를 5%로 낮추고 체적 분율 10% 피브로인을 첨가한 후 세포 생존율과 부착률이 대조군과 비교하여 유의미한 차이가 없음을 보여 피브로인이 DMSO 농도를 낮출 수 있음을 시사합니다. 질량 농도 1% 세리신과 체적 분율 10% 피브로인을 병용한 경우 우수한 동결 효과를 얻을 수 있었습니다.

关键词

저온 보호제;누에고치 단백질;무혈청 보호제;돼지 귀 섬유아세포

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