말초혈액 단핵세포(PBMC)는 중요한 면역세포 자원이지만, 전통적인 느린 동결 방법은 PBMC의 증식을 지연시키고 T 세포 아형에 손상을 일으키므로, PBMC의 활성과 기능을 효과적으로 보호할 수 있는 새로운 동결 공정 개발이 절실히 필요하다. 초음파 얼음 결정화 방식을 통해 PBMC 동결 공정을 최적화했으며, 동결된 PBMC 내 T 세포 아형을 유세포분석법으로 분석했다. 초음파 발생 장치와 프로그램 온도 조절기를 결합한 초음파 얼음 결정화 장치를 구축하여 비접촉식 얼음 생성이 가능하도록 했다. 결과는 초음파 얼음 결정화 동결 공정이 기존의 느린 동결보다 PBMC 동결 효과가 뛰어나며, 동결 후 PBMC 생존율과 누적 증폭 배수가 각각 94.97%와 204.47에 달하고, 동결 해동 후 초기 T 세포(Tn) 비율이 18.35%에 이른다는 것을 보여주었다. 초음파 얼음 결정화 도입을 통한 PBMC 동결 공정 최적화를 통해 PBMC의 동결 후 생존율, 누적 증식 능력 및 T 세포 아형 비율이 향상되어 PBMC 동결에 대한 새로운 최적화 방안을 제시한다.