卵母細胞のガラス化保存の需要が増加しており、現在、手動または自動化保存装置における低温保護剤の段階的な負荷および除去は、卵母細胞の浸透損傷および喪失を引き起こしやすい。 本研究では、低コストで製作が容易なPMMAマイクロ流体チップと石英キャピラリーを組み合わせたマイクロ流体混合システムを構築し、保護剤の連続的な負荷/除去を実現し、後続の液体窒素への浸漬による自動ガラス化保存の準備を行った。 手動多段階法とマイクロ流体法によりマウスMⅡ期卵母細胞に対して低温保護剤の負荷/除去を行い、卵母細胞の体積変化、生存率およびその後の発育率を比較した。 結果は、マイクロ流体法での注入時間8分のグループで卵母細胞の生存率、卵割率および胚盤胞率がそれぞれ93.25％、77.12％、53.00％に達し、手動多段階法より有意に高く、対照群と有意差がなかった（P<0.05）。 PMMAチップと石英キャピラリーを用いたマイクロ流体システムは、卵母細胞の浸透損傷および細胞喪失率を著しく減少させ、操作手順を簡素化し、マイクロ流体技術に基づく卵母細胞および胚の自動ガラス化保存装置の開発における重要な技術的支援を提供する。

ガラス化保存;マイクロ流体;卵母細胞;石英キャピラリー;PMMAチップ