摘要
マイクロ流体チップ上の細胞サンプルの低温保存は、チップ上の細胞実験のサイクルを大幅に短縮し、実験コストを削減し、チップ上細胞実験の広範な応用に寄与します。本論文では、PDMS-ガラス製マイクロ流体チップ上に付着したHepG2細胞の低温保存条件について検討し、冷却速度、低温保護剤、低温保存時間及び保存温度を含め、チップ上付着HepG2細胞の低温保存プロトコールを確立しました。結果として、異なる冷却環境および冷却媒体を用いることで、チップのマイクロチャネル内で0.36～35.12 ℃/分の冷却速度を実現でき、チップ上付着HepG2細胞の低温保存に最適な冷却速度は0.5～1.5 ℃/分であることが示されました。－20 ℃または液体窒素表面上40 cmの冷却環境と－80 ℃の冷却環境の組み合わせ凍結により、チップ上7日間凍結保存したHepG2細胞の生存率が著しく向上しました。体積濃度20%のDMSOと0.1 mol/Lトレハロースの併用は、チップ上凍結したHepG2細胞の活性を著しく向上させました。上述の凍結条件を最適化した結果、チップ上付着HepG2細胞の7日間凍結活性は90%を超えました。
关键词
マイクロ流体チップ; 低温保存; 付着HepG2細胞
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