細胞の低温保存は、臨床治療や科学研究に高品質な細胞を提供します。体積比10％のジメチルスルホキシド（DMSO）と体積比20％の胎仔牛血清（FBS）は、現在細胞の凍結保存で一般的に使用されている保護剤です。しかし、DMSOは細胞に毒性障害を与え、FBSはウイルスの運搬や疾病感染のリスクがあります。本論文では、メイシャン豚耳線維芽細胞をモデル細胞として凍結実験を行い、低温保護剤に絹タンパク質を用いました。異なる質量濃度のセリシンと異なる体積比のフィブロインをそれぞれFBSおよびDMSOの代替として使用し、細胞の低温保存における有効性を検証しました。解凍・復活後、トリパンブルー染色法、MTT法、24時間の付着率などで細胞の生存率と増殖活力を検査し、天然絹タンパク質を基にした最適な低温保護剤処方を選定しました。結果は、質量濃度1％のセリシンと体積比20％のFBSを含む低温保護剤がブタ耳細胞の凍結保存効果に有意な差がないことを示し、セリシンがFBSを効果的に代替できることを明らかにしました。体積比10％のDMSO濃度を5％に下げ、体積比10％のフィブロインを添加したところ、細胞の生存率と付着率は対照群と比較して有意な差がなく、フィブロインがDMSOの濃度を低減できることを示しました。質量濃度1％のセリシンと体積比10％のフィブロインを併用すると、良好な凍結保存効果が得られました。

低温保護剤;絹タンパク質;無血清保護剤;豚耳線維芽細胞