豚卵母細胞の低温保護剤添加および除去過程が浸透損傷に及ぼす影響

Yang Yun ,  

Zhou Xinli ,  

Dai Jianjun ,  

Zhang Defu ,  

Yi Xingyue ,  

Teng Yun ,  

Tao Leren ,  

摘要

卵母細胞の低温保存過程において、低温保護剤の添加および除去は不可欠な工程であるが、この過程により細胞に致命的な浸透損傷および毒性損傷が生じる。豚MII期細胞に対する保護剤の添加と除去の併用過程が損傷程度に与える影響を検討するため、本研究では卵母細胞の低温保護剤を連続的に添加および除去可能なマイクロ流体デバイスを設計・製作した。微小流体制御による線形法と従来の段階的法を用いて低温保護剤の添加および除去を行い、両手法が卵母細胞の体積変化、生存率および発生能に与える影響を解析した。結果は、微小流体制御の線形法による添加および除去時の卵母細胞の体積変化が段階的法より顕著に小さく、線形法処理後の細胞生存率、卵割率、胚盤胞率はそれぞれ95.3%、64.4%、19.4%であり、従来の段階的法(79.4%、43.6%、9.7%)を有意に上回った(P<0.05)。したがって、卵母細胞の低温保護剤添加および除去にマイクロ流体デバイスを用いることは有効であり、細胞の浸透損傷を著しく軽減でき、卵母細胞の低温保存技術に新たな展開をもたらす。

关键词

低温保存;低温保護剤;浸透損傷;卵母細胞

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