Étude des conditions de conservation à basse température des cellules HepG2 adhérentes sur une puce microfluidique PDMS-verre

Zhou Xinli ,  

Peng Tian ,  

Wang Biao ,  

摘要

La conservation à basse température des échantillons cellulaires sur une puce microfluidique permet de réduire considérablement le cycle expérimental des cellules sur la puce, de diminuer les coûts expérimentaux et favorise une large application des expériences cellulaires sur puce. Cet article étudie les conditions de conservation à basse température des cellules HepG2 adhérentes sur une puce microfluidique en PDMS-verre, incluant la vitesse de refroidissement, les cryoprotecteurs, la durée de stockage à basse température et la température de stockage, et détermine un protocole de conservation à basse température pour les cellules HepG2 adhérentes sur la puce. Les résultats montrent que différents environnements de refroidissement et milieux de refroidissement permettent un taux de refroidissement de 0,36 à 35,12 ℃/min dans les microcanaux de la puce ; un taux de refroidissement optimal de 0,5 à 1,5 ℃/min existe pour la conservation à basse température des cellules HepG2 adhérentes sur la puce ; la congélation combinée à -20 ℃ ou à 40 cm au-dessus de la surface d'azote liquide et à -80 ℃ améliore significativement la viabilité des cellules HepG2 congelées sur la puce pendant 7 jours ; une concentration volumique de 20 % de DMSO combinée à 0,1 mol/L de tréhalose augmente significativement l'activité des cellules HepG2 congelées sur la puce. Après optimisation des conditions de congélation mentionnées, l'activité des cellules HepG2 adhérentes sur la puce après 7 jours de congélation dépasse 90 %.

关键词

puce microfluidique; conservation à basse température; cellules HepG2 adhérentes

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