Étude sur la conservation à basse température des fibroblastes de l’oreille du porc Meishan utilisant un cryoprotecteur à base de fibroïne de soie

Teng Yun ,  

Zhou Xinli ,  

Zhang Xiaomin ,  

摘要

La conservation des cellules à basse température fournit des cellules de haute qualité pour le traitement clinique et la recherche scientifique. Une fraction volumique de 10 % de diméthylsulfoxyde (DMSO) et une fraction volumique de 20 % de sérum de veau fœtal (FBS) sont actuellement les cryoprotecteurs couramment utilisés pour la congélation cellulaire. Cependant, le DMSO est toxique pour les cellules et le FBS présente un risque de transmission virale et de maladies infectieuses. Dans cet article, les fibroblastes de l'oreille du cochon Meishan ont été utilisés comme cellules modèles pour les expériences de congélation ; la fibroïne de soie a été utilisée comme cryoprotecteur. Différentes concentrations massiques de séricine et différentes fractions volumiques de fibroïne ont remplacé respectivement le FBS et le DMSO afin de vérifier leur efficacité dans la conservation des cellules à basse température. Après décongélation et réanimation, la viabilité cellulaire et la vitalité ont été évaluées par la coloration au bleu trypan, le test MTT et le taux d’adhésion après 24 heures, permettant de sélectionner la meilleure formulation de cryoprotecteur à base de fibroïne naturelle. Les résultats montrent qu’un cryoprotecteur contenant 1 % de séricine en masse et 20 % de FBS en volume n’a pas de différence significative dans l’effet de congélation des cellules d’oreille de porc, indiquant que la séricine peut efficacement remplacer le FBS. En réduisant la concentration de DMSO de 10 % à 5 % et en ajoutant 10 % de fibroïne en volume, la viabilité et le taux d’adhésion des cellules ne diffèrent pas significativement du groupe témoin, démontrant que la fibroïne peut réduire la concentration de DMSO. La combinaison de 1 % de séricine en masse et 10 % de fibroïne en volume atteint un bon effet de congélation.

关键词

cryoprotecteur;fibroïne de soie;cryoprotecteur sans sérum;fibroblastes de l’oreille de porc

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