Lors du processus de conservation à basse température des ovocytes, l'ajout et le retrait de cryoprotecteurs sont des étapes indispensables, mais ce processus peut entraîner des dommages osmotiques et toxiques mortels pour les cellules. Afin d'étudier le degré de dommage lors du processus combiné d'ajout et de retrait de cryoprotecteurs sur des cellules porcine au stade MII, cet article a conçu et fabriqué un dispositif microfluidique adapté à l'ajout continu et au retrait des cryoprotecteurs chez les ovocytes. Deux méthodes ont été utilisées pour charger et retirer les cryoprotecteurs : une méthode linéaire microfluidique et une méthode traditionnelle par étapes. L'impact des deux méthodes sur la variation de volume des ovocytes ainsi que sur la viabilité et le potentiel de développement a été analysé. Les résultats montrent que la variation du volume des ovocytes lors du chargement et du retrait des cryoprotecteurs par la méthode linéaire microfluidique est nettement plus faible que par la méthode par étapes ; après traitement par la méthode linéaire, la survie cellulaire, le taux de clivage et le taux de blastocystes sont respectivement de 95,3 %, 64,4 % et 19,4 %, significativement supérieurs à ceux obtenus par la méthode traditionnelle par étapes (79,4 %, 43,6 %, 9,7 %) (P<0,05). Par conséquent, l'utilisation d'un dispositif microfluidique pour l'ajout et le retrait de cryoprotecteurs chez les ovocytes est efficace et permet de réduire significativement les dommages osmotiques cellulaires, offrant une nouvelle approche pour la technique de conservation à basse température des ovocytes.

conservation à basse température;cryoprotecteurs;dommages osmotiques;ovocytes