Studie der Kryokonservierungsbedingungen adhärenter HepG2-Zellen auf einem mikrofluidischen PDMS-Glas-Chip

Zhou Xinli ,  

Peng Tian ,  

Wang Biao ,  

摘要

Die Kryokonservierung von Zellproben auf einem mikrofluidischen PDMS-Glas-Chip kann den Zellexperimentzyklus auf dem Chip erheblich verkürzen, die Experimentkosten senken und die breite Anwendung von Zellexperimenten auf dem Chip fördern. In dieser Arbeit wurden die Bedingungen für die Kryokonservierung von adhärenten HepG2-Zellen auf einem PDMS-Glas-Mikrofluidchip untersucht, einschließlich Abkühlrate, kryoprotektiver Mittel, Lagerungsdauer und Lagertemperatur. Es wurde ein Kryokonservierungsprotokoll für adhärente HepG2-Zellen auf dem Chip bestimmt. Die Ergebnisse zeigen: Mit verschiedenen Kühlumgebungen und Kühlmedien kann eine Abkühlrate von 0,36 bis 35,12 ℃/min in den Mikokanälen des Chips erreicht werden; es existiert eine optimale Abkühlrate von 0,5 bis 1,5 ℃/min für die Kryokonservierung adhärenter HepG2-Zellen auf dem Chip; die Kombination einer Kühlumgebung bei -20 ℃ oder 40 cm über der Oberfläche von flüssigem Stickstoff mit einer Kühlumgebung bei -80 ℃ deutlich die Überlebensrate eingefrorener HepG2-Zellen auf dem Chip nach 7 Tagen erhöht; eine Volumenkonzentration von 20 % DMSO zusammen mit 0,1 mol/L Trehalose kann die Aktivität der eingefrorenen HepG2-Zellen auf dem Chip signifikant steigern. Nach der Optimierung der genannten Kryobedingungen übersteigt die Aktivität adhärenter HepG2-Zellen auf dem Chip nach 7 Tagen Kryokonservierung 90%.

关键词

mikrofluidischer Chip; Kryokonservierung; adhärente HepG2-Zellen

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