Untersuchung eines seidenproteinhaltigen Kryoprotektanten zur Erhaltung von Meishan-Schweineohrfibroblasten bei niedrigen Temperaturen

Teng Yun ,  

Zhou Xinli ,  

Zhang Xiaomin ,  

摘要

Die Kryokonservierung von Zellen bei niedrigen Temperaturen liefert hochwertige Zellen für die klinische Behandlung und wissenschaftliche Forschung. Ein Volumenanteil von 10 % Dimethylsulfoxid (DMSO) und ein Volumenanteil von 20 % fötalem Kälberserum (FBS) sind derzeit häufig verwendete Kryoprotektanten für die Zellkonservierung. Allerdings ist DMSO zelltoxisch, und FBS birgt Risiken der Virusübertragung und Infektionskrankheiten. In dieser Arbeit wurden Meishan-Schweineohrfibroblasten als Modellzellen für Gefrierexperimente verwendet, wobei Seidenprotein als Kryoprotektant eingesetzt wurde. Unterschiedliche Massenkonzentrationen von Sericin und unterschiedliche Volumenanteile von Fibroin wurden verwendet, um FBS bzw. DMSO zu ersetzen und deren Wirksamkeit bei der Zellkonservierung bei niedrigen Temperaturen zu überprüfen. Nach dem Auftauen und der Wiederbelebung wurden Zellüberlebensrate und Wachstum mit Trypanblaufärbung, MTT-Test und 24-Stunden-Heftungsrate untersucht, um die beste Formel für einen auf natürlichem Seidenprotein basierenden Kryoprotektanten auszuwählen. Die Ergebnisse zeigen, dass ein Kryoprotektant mit 1 % Sericin Massekonzentration und 20 % FBS Volumenanteil keinen signifikanten Unterschied in der Gefrierrate der Schweineohrzellen aufweist, was darauf hinweist, dass Sericin FBS effektiv ersetzen kann. Wird die DMSO-Konzentration von 10 % auf 5 % reduziert und 10 % Fibroin hinzugefügt, zeigen Überlebens- und Heftungsraten keine signifikanten Unterschiede zur Kontrollgruppe, was darauf hindeutet, dass Fibroin die DMSO-Konzentration senken kann. Die Kombination von 1 % Sericin Massenkonzentration und 10 % Fibroin Volumenanteil erreicht eine gute Gefrierwirkung.

关键词

Kryoprotektant;Seidenprotein;serumfreier Kryoprotektant;Fibroblasten des Schweineohrs

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