Im Verlauf der kryokonservierung von Oozyten sind das Hinzufügen und Entfernen von Kryoprotektoren unverzichtbare Schritte, jedoch können diese Vorgänge tödliche osmotische und toxische Zellschäden verursachen. Um das Schadensausmaß durch den kombinierten Prozess des Hinzufügens und Entfernens von Kryoprotektoren bei Schweine-MII-Zellen zu untersuchen, wurde in dieser Arbeit eine mikrofluidische Vorrichtung entwickelt und hergestellt, die für das kontinuierliche Hinzufügen und Entfernen von Kryoprotektoren bei Oozyten geeignet ist. Es wurden die mikrofluidische lineare Methode und die traditionelle schrittweise Methode zum Laden und Entfernen der Kryoprotektoren verwendet, und deren Einfluss auf Volumenänderungen der Oozyten sowie Überlebensrate und Entwicklungspotenzial analysiert. Die Ergebnisse zeigten, dass die Volumenänderung der Oozyten bei Verwendung der mikrofluidischen linearen Methode deutlich geringer war als bei der schrittweisen Methode; nach der linearen Behandlung betrugen Überlebensrate, Spaltungsrate und Blastozystenrate 95,3 %, 64,4 % bzw. 19,4 %, was signifikant höher war als bei der traditionellen schrittweisen Methode (79,4 %, 43,6 %, 9,7 %) (P<0,05). Daher ist der Einsatz der mikrofluidischen Vorrichtung zum Hinzufügen und Entfernen von Kryoprotektoren bei Oozyten effektiv und kann osmotische Zellschäden deutlich reduzieren, wodurch ein neuer Ansatz für die Kryokonservierungstechnologie von Oozyten geboten wird.

Kryokonservierung;Kryoprotektoren;osmotische Schäden;Oozyten