Mechanismus der Gefrierschäden von Mikroträger-Leberzellkomplexen und Optimierungsstrategien

Hao Binjiang ,  

Yu Zengying ,  

Liu Baolin ,  

摘要

Um die Überlebensrate der Zellen und die Bindungsrate zu verbessern, haben wir das Gefrierungsschema für Mikroträger-Leberzellkomplexe im künstlichen Leberunterstützungssystem optimiert. Wir haben experimentell den Einfluss unterschiedlicher Volumenanteile von Kryo­schutzmitteln, Lade­temperatur und -methode auf die Zell­gefrier­effekte bewertet. Die Studien zeigten, dass die Verwendung eines Volumenanteils von 5% Dimethyl­sulfoxid (Me2SO) bei Vor­kühlung auf 4 °C und durch zweistufige Beladung die Zellentoxizität und das Eindring­schäden deutlich reduziert und eine hohe Zellenüberlebensrate und Bindungsrate aufrechterhält. Darüber hinaus haben wir auch den Einfluss der Abkühlungs­geschwindigkeit und der Bildung von intrazellulärem Eis auf die Zell­gefrier­effekte untersucht, wobei bei -6 °C das Entstehen von intrazellulärem Eis die Schäden mildern und die Zell­bindung nach erfolgreicher Wieder­herstellung erhöht kann. Bei einer Abkühlungs­geschwindigkeit von 1 °C/min und einem Volumenanteil von 10% Me2SO, obwohl eine hohe Toxizität und Ein­dring­schäden vorliegen, war durch minimale Unterschiede in der thermischen Ausdehnung der Gefriereffekt optimal. Die Ergebnisse der Studie können technische Unterstützung zur Gefrierung von Mikroträger-Leberzellkomplexen im künstlichen Leberunterstützungssystem bieten.

关键词

Lagerung bei niedriger Temperatur, Mikroträger-Leberzellkomplexe, Kryoprotektor, thermischer Expansionsschaden

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